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網站首頁解決方案 ◇ 無需衍生快速檢測水果中草甘膦及其代謝物
無需衍生快速檢測水果中草甘膦及其代謝物
發布日期:2020/3/30

水果中草甘膦及其代謝物的測定SPE-UPLC-MS/MS法解決方案

草甘膦是一種非選擇性、無殘留滅生性除草劑,對多年生根雜草非常有效,廣泛用于橡膠、桑、茶、果園及甘蔗地。草甘膦的使用量逐年增加,給農作物、人類健康以及生態環境帶來了一定的安全隱患。目前常用草甘膦及其代謝物的檢測方法通常存在操作時間長、需要衍生等問題。

迪馬科技在參考各種標準及文獻的基礎上,建立了水果中草甘膦及其代謝物氨甲基膦酸的測定SPE-UPLC-MS/MS法:采用水提取,ProElut GLY固相萃取專用柱凈化樣品,收集流出液,Dikma Polyamino HILIC色譜柱分離檢測,該方法特點:

1) 前處理步驟少,提取液直接通過凈化柱接收流出液即可;

2) 有機溶劑消耗量小,前處理過程中也無需使用酸堿試劑;

3) 儀器分析簡單,樣品無需衍生直接分析,可提高結果穩定性及減少實驗成本;

4) 方法定量限0.05 mg/kg。

 

以下為詳細解決方案,敬請參考!

 

水果中草甘膦及其代謝物的測定SPE-UPLC-MS/MS法

1、適用范圍

    本方法適用于蘋果和橘子中氨甲基膦酸和草甘膦的檢測,定量限0.05 mg/kg。

2、標準品配制

單標標準儲備液:準確稱取各標準品,用水配制成1000 μg/mL的單標標準儲備液。

混標標準中間液:分別吸取各單標標準儲備液,用水配制成1.0 μg/mL和10 μg/mL的混標標準中間液。

3、提取

    取2 g樣品于50 mL離心管中,加入8 mL水、10 mL二氯甲烷,振蕩10 min,超聲10 min,8000 rpm離心5 min,取全部上清液于10 mL容量瓶中,用水定容至刻度,混勻,取5 mL,待凈化。

 

 

4、凈化——ProElut GLY 6 mL (Cat.#: 65938)

(1)活  化:

依次加入5 mL甲醇、5 mL水,棄去流出液

(2)上  樣:

將待凈化液加入柱中,棄去前3 mL流出液,收集后2 mL流出液,混勻,濾液過0.22 μm尼龍濾膜,上機分析

注:同方法制備基質匹配標準溶液。

5、UPLC-MS/MS條件

5.1 UPLC 條件

色譜柱:Dikma Polyamino HILIC, 150 × 2.0 mm, 5 μm (Cat.#:99302)

流  速:0.2 mL/min      進樣量:10 μL       柱  溫:35

流動相: A:乙腈   B:5 mM乙酸銨溶液,氨水調節至pH=11

梯度設置:

 

Time(min)

0

2

2.1

8

8.1

15

A(%)

80

80

20

20

80

80

B(%)

20

20

80

80

20

20

 

5.2 質譜條件

電離模式:ESI

掃描方式:負離子掃描

檢測方式:多反應監測     

電噴霧電壓:-4500 V

霧化氣壓力:60 psi       

輔助氣壓力:60 psi

氣簾氣壓力:35 psi       

離子源溫度:550

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

目標化合物

定性離子對

(m/z)

(母離子/子離子)

定量離子對

(m/z)

(母離子/子離子)

碰撞氣能量/eV

去簇電壓/V

草甘膦

167.8/62.8

167.8/62.8

-30

-50

167.8/81.0

-21

-31

氨甲基膦酸

109.9/62.8

109.9/62.8

-23

-53

109.9/78.9

-35

-51

 

6、添加回收結果

水果中氨甲基膦酸和草甘膦的LC-MS/MS檢測添加回收結果:

樣品基質

回收率(%)

添加水平:0.05 mg/kg

添加水平:0.5 mg/kg

加標量:1.0 μg/mL,加100 μL

加標量:10 μg/mL,加100 μL

草甘膦

氨甲基膦酸

草甘膦

氨甲基膦酸

蘋果

86

85

82

88

橘子

143

93

87

106

 

         氨甲基膦酸10 ng/mL標準品XIC                                氨甲基膦酸50 ng/mL標準品XIC圖

 

        氨甲基膦酸100 ng/mL標準品XIC                                 氨甲基膦酸250 ng/mL標準品XIC圖

 

氨甲基膦酸500 ng/mL標準品XIC

 

 

 

氨甲基膦酸的標準曲線圖

R^2 = 0.9990

標準曲線濃度分別為:10 ng/mL50 ng/mL100 ng/mL250 ng/mL500 ng/mL

草甘膦10 ng/mL標準品XIC                                          草甘膦50 ng/mL標準品XIC

 

草甘膦100 ng/mL標準品XIC                                            草甘膦250 ng/mL標準品XIC

 

 

草甘膦500 ng/mL標準品XIC

 

草甘膦的標準曲線圖

R^2 = 0.9990

標準曲線濃度分別為:10 ng/mL50 ng/mL100 ng/mL250 ng/mL500 ng/mL

 

水果中草甘膦及其代謝物的測定SPE-UPLC-MS/MS法相關產品信息:

 

貨號

名稱

規格

樣品前處理

65938

草甘膦檢測專用固相萃取柱  ProElut GLY

6 mL, 30/pk

244358

12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

12位

4803

1,3,6 mL柱管通用連接器

15/pk

4806

考克(控制流量)

15/pk

99011

真空/正壓兩用泵,無油

1/pk

99013

抽濾瓶套裝

(包括硅橡膠管2米,2 L抽濾瓶及橡膠塞)

1/pk

30039

FitMax針頭式過濾器 Nylon

13 mm, 0.22 μm 100/pk

標準品

12-MET-12133A-100MG

氨甲基膦酸 [1066-51-9]

100 mg

46010

草甘膦 [1071-83-6]

100 mg

色譜柱及保護柱

99302

Dikma Polyamino HILIC

150 x 2.0 mm, 5 μm

HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑

50101

乙腈  HPLC級

4 L

50102

甲醇  HPLC級

4 L

50117

二氯甲烷  HPLC級

4 L

50138

乙酸銨 HPLC級

100 g

通用色譜產品

52401B

瓶架/藍色(現貨)

50孔

52401A

瓶架/白色(現貨)

50孔

1034

樣品瓶(棕色/螺紋)

2 mL, 100/pk

1035

樣品瓶蓋/含墊(已經組裝)

100/pk

H80465

HPLC 進樣針

25 μL

紅色產品貨號#30039、#1034、#1035*

北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

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